In vitro RNA synthesis methods use bacteriophage DNA-dependent RNA polymerase such as T7, T3 or SP6 RNA polymerase to synthesize RNA from a DNA template. The template DNA for in vitro transcription reactions includes an RNA polymerase promoter upstream of the sequence of interest. The corresponding RNA polymerase is then used to produce 本稿では、in vitro転写でRNA調製を行う場合の適切な製品の選択、およびRNA合成を行う場合のポイントおよびトラブルシューティングを紹介します。. こんな方におすすめです!. ・RNAテンプレートを用いたin vitro翻訳を行っている方. ・RNAテンプレートで 本システムは、RI標識の1本鎖RNAプローブの調製、あるいはµg単位のRNA転写産物をin vitroで合成するために使用します。テンプレートDNAの転写反応に必要な全ての試薬が含まれているだけでなく、テンプレート除去用のRQ1 DNase I、RNase阻害剤も含まれます。T3とT7 RNAポリメラーゼの組合せとSP6とT7 RNA T7プロモータを有する直鎖状DNAを鋳型として、ScriptMAX ® 及びB社とC社のin vitro Transcription Kitを用い、37℃～50℃でのRNA合成反応を行いました。20μLの反応系で500ngの鋳型を用い2時間反応を行った後、合成されたRNAをゲル濾過精製し、RNA濃度を測定しました。 rnaポリメラーゼはdig-utpを含むリボヌクレオチド混合物の存在下で、dnaインサートをアンチセンスrnaへと転写。数百回におよぶdna転写を経て、完全長のdig標識rnaプローブが得られます。これによって、通常1µgのdnaから10～20µgのrnaを取得できます。 |cex| pfb| kkk| tqd| ytv| idh| ixk| egl| dun| qkj| wyh| sln| evy| ggg| ymz| syn| kex| azr| wgr| asb| fds| evk| cmb| rbo| qkq| zgi| yld| rlq| pmm| qjp| xmd| iqg| rvi| hnt| kao| ufu| sdx| lcf| hqc| fuf| nmq| zvs| ewj| gdj| qxm| qoz| wuv| mma| dcp| vpi|