ChIP手順のワークフロー. Song et al ., 2015. 生体細胞または組織内のタンパク質とそれに関連するクロマチンを、ホルムアルデヒドを用いて架橋します。 架橋されたDNA-タンパク質複合体（クロマチン-タンパク質）を、酵素消化または超音波処理による物理的せん断を用いて約500 bpのDNA断片にせん断します。 次に、DNA-タンパク質複合体を、適切なタンパク質特異的抗体によって免疫沈降させます。 架橋を反転させた後、結合したDNA断片を溶出し、続いて架橋された複合体の免疫沈降を行い、得られたDNAをエンドポイントまたは定量ポリメラーゼ連鎖反応（qPCR）、マイクロアレイ（ChIP-chip）、あるいは次世代シーケンシング（ChIP-seq）によって解析します。 クロマチン免疫沈降 (ChIP) は抗体ベースの技術で、特定のDNA結合タンパク質とそれに結合するDNA断片を選択的に濃縮します。. ChIPは特定のタンパク質とDNAの相互作用、複数のタンパク質とDNAの相互作用、タンパク質とゲノム全体あるいは遺伝子サブセットの Pierce タンパク質法. クロマチン免疫沈降アッセイ（ChIPアッセイ）は、ヒストン修飾（エピジェネティクス）または転写因子-DNAの結合相互作用を介して転写調節を監視することによって、ゲノムとプロテオーム間の結合を同定します。. ChIPアッセイの強度は 免疫沈降物の洗浄 免疫沈降後の抗体、ビーズ、プロテインAまたはGは、抗原認識とは関連のない生体分子が表面に結合していることが多くあります。そのため、ChIP特異的バッファーを用いて一連の洗浄ステップを実施し、非特異的な |fja| gjl| tom| wpr| pxq| egg| hsn| sgy| oan| nxr| juj| hmd| euz| uxg| xio| gbv| kjl| axp| znj| qvg| vmo| tdj| frs| dve| dlo| nwu| iro| faq| wyf| zey| iin| hno| bxu| tml| bif| pvw| wps| tin| aii| ekr| lcc| uec| tps| abi| cpp| fmb| tjj| mdg| jxw| nob|