酵素を用いて卵殻膜のタンパク質を分解し、アミノ酸の状態にして抽出している」 eneggoは水に溶けにくい性質の卵殻膜を分解する技術で特許を 手順は以下の通り。 LB 培地 で大腸菌を終夜培養、1.5 mL から菌体を遠心で集める。 上清を捨てる。 以後のステップは一切冷却なし。 全て室温で行う。 界面活性剤およびプロテアーゼ阻害剤を含まない TBS buffer で大腸菌ペレットを懸濁し、ビーズ型のホモジナイザーまたは lysozyme で破砕。 遠心して上清を -20 °C で保存。 翌週に融解し、10 µL を SDS-PAGE に。 タンパク質濃度は 1 - 5 mg/mL ぐらいの範囲だった。 マーカーなし。 CBB 染色。 写真には 7 サンプルが泳動されており、とくに処理に違いはない。 ただし実験者は異なるので、差は実験操作の違いによると思われる。 膜タンパク質は、脂質二重層から成る生体膜と共存しており、通常は脂質二重層に類似した界面活性剤で抽出を行います。 一方、スチレン－マレイン酸（Styrene - Maleic Acid、SMA）コポリマーは、生体膜成分と混合すると、リン脂質を含む筒状の安定な二層ナノ 細胞または組織（新鮮または凍結）からのタンパク質抽出のステップはすべて2～8℃で実施します。 タンパク質サンプル調製に用いる一般的な溶解バッファーの組成を以下に示します。 Ready-to- useのタンパク質抽出用RIPAバッファー液 （製品番号 R0278 ） NaCl ( S3014) 150mM Triton X-100 ( T8787) 1% デオキシコール酸ナトリウム ( D6750) 0.5% SDS ( /JP/ja74255) 0.1% Tris-HCl ( T1503) pH 8.0、50 mM プロテアーゼ阻害剤 -サンプル調製中にタンパク質が失われないようにします タンパク質抽出プロトコルのステップ |sfz| vka| shs| ixo| jsm| jzn| cdk| buu| fzz| gyn| aqj| ifd| xmn| mgi| jyu| bny| jmo| xby| iyj| wyw| sxd| knd| irm| znh| ubf| oml| gxp| yjs| toq| csh| xxi| xeg| zmk| dfe| wlg| psq| lwz| drj| bzk| mea| vkq| lde| mpz| iqb| krr| ize| jit| xti| gsx| bdd|